凝胶色谱仪

⒈仪器型号：

Waters 1515 高压泵，2414示差折光检测器，7725i手动进样器

2          技术指标：

泵流速范围：0.001～10.0mL/min，准确度：±1.0%，差折光检测器 RI 范围：1.00—1.75 RIU，测量范围：5.0 x 10-4～7.0 x 10-9RIU，脂溶性分子量范围：100－4×106，水溶分子量范围：200-300000

⒊功能简介：

分析有机材料、大分子蛋白等高聚物的分子量及分布。

⒋操作规程

⑴开机，依次开计算机、泵、柱温箱和示差折光检测器，待所有设备通过了测试（约5分钟）后，双击Breeze软件，用户名为:Breeze。

⑵创建项目和仪器方法

单击命令栏上的View Method、出现“New Processing Parameters”选择LC后确认。

单击命令栏上的“Instrument Parameters”,对每个仪器和参数进行修改，然后从“file”中选择“Save as”后保存。

⑶冲洗和灌注系统

①单击采集栏上的(Purge Wizard),选择purge pump(s)冲洗该泵，也可选择purge Injector 或者Purge Detector, 然后next.

②如果未灌注泵，应按照“Prime Pump”页中的过程操作，打开排液阀，用灌注注射器抽取10mL的洗脱液后关闭排液阀。

③打开参考阀，冲洗时的默认流速为5mL/min,也可在标尺下方的文本框中输入新的流速。

④单击next，“purging  pump”页面出现，“purging  Time”监视冲洗时间（默认5分钟），也可按“stop purge”按钮停止。冲洗完成后，单击next，“Close reference valve”页将出现。

⑤关闭该泵参考发，单击next 或者Finish。

⑷平衡系统

单击采集栏上的（Equilibrate）, “Status”显示系统平衡的状态。，从下拉菜单中选择建立的Method后，单击平衡。大约平衡20分钟或直到基线稳定。

⑸单次进样

单击采集栏上的，“Specify Single Inject Parameters”将出现，输入样品名称，Method，进样体积和时间等。

⑹ 向方法中添加处理参数

单击命令栏上的find data,选择样品组。单击（Review Data）,选择色谱，单击（Processing Parameters Wizard）,单击“Start New Processing Parameters”,然后单击OK，指定积分、校正和峰值参数后单击Finish。

⑺ 处理样品组

⑻ 预览和保存报告

单击命令栏上的find data,然后单击results。右键单击要预览该结果的行号，选择preview,选择报告方法，也可另存为pdf,ASCII或者EMF文件。

5.注意事项

⑴ 水溶性色谱柱保存时必须充满叠氮化钠。

⑵ 脂溶性色谱柱常用溶剂为THF、DMF和甲苯。

⒍仪器安全责任人：王建宏