二元高效液相色谱仪

⒈仪器型号： Waters 1525

⒉技术指标：

二元高压梯度泵最大压力6000psi，流速范围0.00-10.00mL/min；精度≤0.1%RSD，2489紫外检测器波长范围190-700nm，准确度：±1nm。

⒊功能简介：

该二元高效液相色谱仪用来进行有机物的定量和定性分析。

⒋操作规程

1        开机，依次开计算机、泵、柱温箱和紫外检测器，待紫外检测器自检完成后，双击Breeze软件，用户名为:Breeze。

⑵创建项目和仪器方法

①依次点击管理、项目、创建项目（勾选从项目复制方法），输入项目名称。

②依次点击选择（改变项目、系统）、方法组、新建泵、柱子和紫外的方法。

⑶排气，注射器插入抽气孔，逆时针旋转排气开关一周，抽注射器活塞；

⑷洗泵，清洗阀搬到右，点击水龙头，A,B总流量设为6ml,运行10分钟；

⑸平衡色谱柱，停泵，清洗阀搬到左，点击水龙头，A,B总流量设为不超1ml，变化率5分钟，运行 10-30分钟；

⑹进样，进样扳手到load,点击“单进样图标”，设置样品，点击进样，进样针在待测液中润洗2-3次后，吸取待测液插入进样口，迅速将扳手扳到Inject,拔针；

⑺清洗进样针，然后利用医用注射器配上Needle port cleaner,吸取甲醇或者甲醇-水溶液清洗进样系统。

⑻继续进样，重复(6)-⑺。

⑼数据处理（只有通道和结果可用）

①建立方法组，点击查询数据、通道，双击数据，点击处理参数向导，新建处理方法，用手选峰，输入组分名称。

②建立外标曲线（输入浓度），选择数据，点击右键，修改样品，选择类型（标准样或者未知样），点击“量”的图标，从处理方法复制，输入单位后，可利用Ctrl+D复制，保存。关闭后点击菜单栏的更新。

③浓度与峰面积关联，选择标准样后，点击右键，处理，使用指定的处理方法（选择方法名称，勾选清除较正）后确定，在界面“结果”里，双击“校正曲线”。

④打印报告，“结果”面选中样品，预览，打印或者保存为PDF.

⑤导出谱图，查询数据，选中导出的数据，点击工具栏（数据库），导出数据，选中Export Raw Data,（勾选替代导出方法的文件缺省值），输入文件名和路径，点击确定。找到后缀为arw的文件，在excel里面打开。

⑽冲洗, 其分为两种情况，第一种为A泵为甲醇，B泵为水，不用停泵，点击水龙头，将A泵流量设为1，B泵流量设为0，变化率设为5分钟，冲洗30分钟左右。第二种情况为流动相只有一种，点击水龙头，设置A（或B）泵流量为0，变化率为5分钟。等泵停运后，将流动相换为甲醇溶液，设置从0到1，5分钟的变化率，冲洗30分钟左右。

⑾点击水龙头，设置5分钟的变化率，将甲醇流量从1变化为0后，拆下色谱柱，关软件，然后关仪器。

⒌注意事项

⑴装好色谱柱后，设置A,B总流量不能超过1毫升，且必须有变化率。

⑵样品一定要用有机相针式过滤器过滤。

⒍仪器安全责任人：韩严和